Tudományos módszer az NMN mennyiségi meghatározására biológiai mintákban
1. Bevezetés
Kiegészítésnikotinamid-mononukleotid (NMN)a nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD+) szintjének felszabályozása érdekében ígéretes öregedésgátló beavatkozásnak bizonyult. A NAD+ intermedierek pontos számszerűsítése azonban továbbra is komoly kihívást jelent,NMNfőleg. Ez a tanulmány egy új módszert, a kettős izotóp által közvetített LC-MS/MS módszertant (dimeLC-MS/MS) vezeti be aNMNbiológiai mintákban.
2. Az NMN pontos kimutatását befolyásoló tényezők
Az NMN-t nehéz pontosan kimutatni az enzimatikus lebomlással, a mintafeldolgozás során fellépő konverzióval, a különböző oszlop- és extrakciós körülmények között tanúsított összetett viselkedésével, valamint a mátrixhatással szembeni érzékenysége miatt.
Pontosabban, az NMN nagy polaritású és alacsony illékonysági tulajdonságokkal rendelkezik, amelyek vízben könnyen oldódnak, de szerves oldószerekben nehezen oldódnak. Ezek a tulajdonságok nagymértékben korlátozzák számos hagyományos kvantitatív elemzési módszer alkalmazását.
BIológiai mintákpéldáula vér jelentős CD38 és CD73 aktivitást hordoz (ECTO-5’-nukleotidáz), mindkettő NMN-t használhat szubsztrátként.
Az NMN viselkedése az oszlopban nagyon összetett, valószínűleg a töltések kétoldalú jellege miatt, így az extrakció és az oszlop körülményeinek finom különbségei jelentősen befolyásolják az NMN megbízható és pontos kimutatását.
3. A megküzdési stratégiákdimeLC-MS/MSaz impakt tényezők hatásának csökkentése
A fent említett tényezők interferenciájának elkerülése érdekében egy NMN-2 prototípus oszlopot alkalmaznak. Ez az oszlop C18 alapú, nagy tisztaságú szilícium-dioxid részecskéket tartalmaz, amelyek jobban képesek megkötni a hidrofil vegyületeket, mint a szénrészecskék, javítva az elválasztási képességet.
Perklórsavat (PCA) alkalmaznak, mivel minimális veszteséggel hatékonyan képes kivonni a NAD+-t és az NMN-t biológiai mintákból, például plazmából.
A mátrixhatások beállítása érdekében a PCA extrakció előtt minden izotópos vegyületből fix mennyiséget (1 μM) adnak a biológiai mintákhoz.
4. Az előnysdimeLC-MS/MS
Az LC-MS/MS-vezérelt módszertanban a kettős izotópos NMN standardok, az NMN (M + 14) és az NMN (M + 5) pontosan nyomon követhetik az NMN sorsát a mintafeldolgozás során, ami jelentősen növeli az NMN mérés pontosságát és megbízhatóságát biológiai mintákban. Emellett a dimeLC-MS/MS képes értékelni az extrakció hatékonyságát és az NMN abszolút koncentrációját különböző típusú biológiai mintákban.
5. Következtetés
Thvanúj LC-MS/MS-A kettős izotópos NMN standardokkal vezérelt módszertan pontosan és megbízhatóan mérheti az NMN-t biológiai mintákban.Felhasználható az NMN bevitelével kapcsolatos jövőbeli vizsgálatokhoz.
6. Hivatkozás
Unno, Junya et al. "A nikotinamid-mononukleotid abszolút mennyiségi meghatározása biológiai mintákban kettős izotóp által közvetített folyadékkromatográfiás-tandem tömegspektrometriával (dimeLC-MS/MS)." npj öregedés vol. 10,1 2. 2024. január 2., doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Miért válassza aBONTAC?
BONTACvezető szerepet tölt be a globálisNMNipar. Rendelkezünk az első teljes enzim katalízis technológiával Kínában, és vezető vállalkozássá váltunk a koenzim termékek terén, amelyeket széles körben használnak az egészségiparban, az orvostudományban és a szépségápolásban, a zöld mezőgazdaságban, a biomedicinában és más területeken. Nevezetesen, a BONTAC NMNa Harvard Egyetem híres David Sinclair csapatának nyersanyag-beszállítója. Szolgáltatásaink és termékeink megbízhatóak. TovábbáBONTACfüggetlen koenzimmérnöki technológiai kutatóközponttal rendelkezik tartományi szinten Kínában és saját tulajdonú gyárakkal, ahol biztosítható a termékek tisztasága és stabilitása.
Lemondás
Thvancikka következők alapján a hivatkozás atudományos folyóirat. A vonatkozó információk a következők:ellátkizárólag megosztási és tanulási célokra, és nem képvisel semmilyen orvosi tanácsadási célt. Jogsértés esetén kérjük,érintkezésA szerzőrészéreDeletion. Az ebben a cikkben kifejtett nézetek nem képviselik aBONTAC.