Tudományos módszer az NMN mennyiségi meghatározására biológiai mintákban
1. Bevezetés
Kiegészítésnikotinamid mononukleotid (NMN)a felszabályozásSzint ofnikotinamid adenin dinukleotid (NAD+)ígéretes öregedésgátló beavatkozásként mutatták be. Azonban ez még mindig komoly kihívás a pontosNAD+ köztes anyagokat quantálni, NMN Különösen. Ez a tanulmány egy új módszert, a dupla izotóp-közvetített LC-MS/MS módszertét (dimeLC-MS/MS) vezeti be a pontosan aNMN Biológiai mintákban.2. Az NMN pontos kimutatását befolyásoló tényezők
Az NMN-t nehéz pontosan kimutatni az enzimatikus érzékenység miattlebomlása, a mintafeldolgozás során történő átalakítása, összetett viselkedése különböző oszlop- és kivonási körülmények között, valamint mátrixhatás.
Konkrétan az NMN rendelkezik a magas polaritással és alacsony volatilitással bírva, amely könnyen oldható vízben, de nehéz szerves oldószerekben oldani. Ezek a tulajdonságok jelentősen korlátozzák sok hagyományos kvantitatív elemzési módszer alkalmazását.
BIológiai mintákpéldául a vér jelentős CD38 és CD73 (ECTO-5) működését hordozza’-nukleotidaz), amelyek mindkettőjükben NMN-t használhatnak szubsztrátként.
Az NMN viselkedése az oszlopban nagyon összetett, valószínűleg a töltések kétoldalú természete miatt, így a kivonási és oszlop körülményeinek finom különbségei jelentősen befolyásolják az NMN megbízható és pontos detektálását.
3. Megküzdési stratégiákdimeLC-MS/MS az ütközési tényezők hatásának csökkentése
A fent említett tényezők interferenciájának elkerülése érdekében a pRototípusoszlopNMN-2 alkalmazzák. Ez a rovattartalmazzas C18-alapú, nagy tisztaságú szilícium-részecskék amelyek jobban képesek a hidrofil vegyületekhez kötődni, mint a szénrészecskék, javítva a szétválasztás képességét.Perklorsav (PCA) azért alkalmazzák, mert képes hatékonyan kinyerni a NAD+ és NMN biológiai mintákból, például plazmaból minimális Veszteségek.
A mátrixhatások korrigálásához,a fix mennyiség (1 μM) mindegyikből Izopép vegyületis hozzáadvaBiológiai minták PCA kivonása előtt.
4. Az előnys dimeLC-MS/MS
Double izokóp NMN szabványok, NMN (M + 14) és NMN (M + 5) az LC-MS/MS-alapú módszertanban pontosan nyomon követhetik az NMN sorsát a mintafeldolgozás során, amelyjelentősen növeli az NMN-mérés pontosságát és megbízhatóságát biológiai mintákban. Ezen túlmenően a dimeLC-MS/MS képes értékelni az NMN kivonási hatékonyságát és abszolút koncentrációját különböző típusú biológiai mintákban.
5. Összegzés
Thaz új LC-MS/MS-A módszertan kettős izogópikus NMN szabványokkal lehet Accurately és reliably mérjük meg NMN-t biológiai mintákban. Használható a jövőbeni vizsgálatokhoz az NMN-bevitelről.6. Hivatkozás
Unno, Junya és mtsa. "A nikotinamid mononukleotid abszolút kvantifikálása biológiai mintákban dupla izotóp-közvetített folyékony kromatográfia-tandem tömegspektrometriával (dimeLC-MS/MS)." NPJ aging, 10,1 2. kötet. 2024. január 2., doi:10.1038/s41514-023-00133-1Miért választodBONTAC?
BONTACa globális vezetőjeNMNIpar. Kínában megvan az első teljes enzim katalízis technológiá, és a vezető vállalattá váltunk Koenzimtermékek, amelyeket széles körben használnak az egészségiparban, az orvostudományban és szépségápolás területén, zöld mezőgazdaság, biomedicina és más területek. Figyelemre méltó,BONTAC NMNa híres David Sinclair csapatának nyersanyag-beszállítója a Harvard Egyetemen. Szolgáltatásaink és termékeink megbízhatóak. Továbbá,BONTACvanegy függetlenKoenzim Mérnöki Technológiai Kutatóközpont tartományi szinten Kínában és önálló gyárak, ahol a termékek tisztasága és stabilitása garantált.
